摘自：衛(wèi)生部出版的《消毒技術規(guī)范（2002年版）》P72-74
2.1.5.8臭氧水消毒器
2.1.5.8.1 目的
檢測臭氧水消毒器發(fā)生的臭氧水消毒劑對物品表面的消毒效果，以驗證臭氧水消毒劑對物品表面消毒的實用劑量。
臭氧水消毒劑指應用臭氧消毒設備制備的含臭氧的水溶液，并以其作為消毒劑，用于對物品表面等的消毒。
2.1.5.8.2  試驗器材
    (1) 金黃色葡萄球菌( ATCC 6538 )、大腸桿菌( 8099 )、銅綠假單胞菌（ ATCC 15442 ）、白色念珠菌( ATCC 10231 )懸液和脊髓灰質炎病毒懸液。
    (2) 染菌載體(10mm×10mm，以布片為代表，必要時可隨消毒對象，增用或改用其他載體)。
    (3) 臭氧采樣裝置。
    (4) 細菌定量殺滅試驗用器材與培養(yǎng)基(見 2.1.1.7，2.1.1.9 )。
    (5) 脊髓灰質炎病毒滅活試驗用試液、培養(yǎng)基和器材(見 2.1.1.10 )。
(6) 溫度與濕度計。
(7) 500 ml塑料杯。
(8) 水流量計（1L/min～10L/min）。
(9) 不銹鋼網(wǎng)。
(10) 臭氧濃度測定用臭氧分析儀和化學滴定法用試劑、器材等。
2.1.5.8.3 臭氧濃度測定
臭氧濃度的測定方法分為化學滴定法和儀器測定法。
    儀器測定法按儀器使用說明書要求進行。
（1）通過式臭氧消毒設備
測定水樣流出消毒設備后臭氧濃度由高到低的衰變曲線。測定時，若出水流量可調，設 3 個流量其中應包括該設備的很大流量和很小流量，若出水流量不可調，則按說明書要求設 1 個流量，各流量水樣流出消毒設備后，即刻測定水樣中臭氧含量，然后再將水樣放 20℃ 水浴中，設 5個～6個時間段，分別測定水樣中臭氧含量，并繪制臭氧濃度衰變曲線。
（2）暴氣式臭氧消毒設備
測定一定容量的水體中臭氧濃度由低到高，直到臭氧濃度達飽和時的濃度變化曲線。按說明書要求，加入規(guī)定容量的水樣，通入臭氧氣體，設 5個～6個時間段（應測出臭氧濃度達飽和時的很短時間），分別測定水樣中臭氧含量，并繪制臭氧濃度變化曲線。
2.1.5.8.4 殺滅微生物試驗操作程序
按臭氧設備制備臭氧水消毒劑的方式分為暴氣式與通過式兩類。
（1）暴氣方式臭氧消毒設備制備臭氧水消毒劑的殺滅微生物試驗
①按 2.1.1.2 所示相關方法制備金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、枯草桿菌黑色變種芽孢、白色念珠菌、黑曲霉孢子的菌片。必要時，可增設其他試驗微生物。   
②有專用容器者，按說明書要求向專用容器內加入規(guī)定容量的無菌蒸餾水無專用容器者，用容量≥3000ml的燒杯，盛裝3000ml無菌蒸餾水樣，調水溫至20℃±2℃
若無專用容器但需在更大容量的水樣中進行試驗者，示消毒設備狀況，按使用說明書要求調整水樣用量，并調水溫至20℃±2℃。
③將不銹鋼網(wǎng)放盛水容器底部中央，染菌布片放不銹鋼網(wǎng)表面，染菌布片上再蓋一不銹鋼網(wǎng)片。
④連接微孔擴散裝置與臭氧氣源出口，開啟臭氧消毒設備，開始消毒處理。
⑤待臭氧暴氣浸泡消毒至規(guī)定作用時間（第一個作用時間應不少于水中臭氧達飽和濃度所需時間），取出樣片，移入含5 ml中和劑溶液的試管中，中和10 min，進行活菌計菌。
⑥試驗同時設陽性對照和陰性對照組，陽性對照用無臭氧氣體代替臭氧氣體，在水樣體積和暴氣量等相同條件下，將染菌樣片暴氣浸泡至很長作用時間，取出樣片，進行活菌計數(shù)。
⑦試驗重復3次。
⑧根據(jù)各組殺滅對數(shù)值計算結果，確定殺滅細菌繁殖體，真菌或細菌芽孢的殺滅對數(shù)值為3所需很低有效濃度和相應的作用時間。
（2）通過式臭氧消毒設備制備的臭氧水消毒劑流動載體浸泡殺滅微生物試驗
①按 2.1.1.2 所示相關方法制備金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、枯草桿菌黑色變種芽孢、白色念珠菌、黑曲霉孢子的菌片。必要時，可增設其他試驗微生物。   
②將臭氧水消毒設備開機5min，使臭氧水中臭氧含量穩(wěn)定。
③取不銹鋼網(wǎng)放盛水容器底部中央，染菌布片放不銹鋼網(wǎng)表面，染菌布片上再蓋一不銹鋼網(wǎng)片。用臭氧水消毒劑沿容器壁流下，流動浸泡消毒至說明書規(guī)定作用時間，取樣檢驗。
④試驗同時設陽性和陰性對照。陽性對照組用自來水代替臭氧水消毒劑，在相同流量下流動浸泡至很長作用時間。取出樣片，進行活菌計數(shù)。
⑤取本次試驗同批的 PBS 和培養(yǎng)基接種培養(yǎng)基培養(yǎng)，作為陰性對照。
⑥試驗重復3次。
⑦根據(jù)各組殺滅率計算結果，確定殺滅細菌繁殖體、真菌或細菌芽孢的殺滅對數(shù)值為3所需很低有效濃度和相應的作用時間。
2.1.5.8.5 脊髓灰質炎病毒滅活試驗
(1) 按 2.1.1.10.3 所示方法制備脊髓灰質炎病毒懸液。若無特殊要求，用玻片為載體。
(2) 將制備的脊髓灰質炎病毒玻片加到無菌試管中，使帶有病毒的一面向上。
    (3) 將臭氧水消毒設備開機5min，使臭氧水中臭氧含量穩(wěn)定。
(4) 向含有脊髓灰質炎病毒玻片的試管中加入1.0ml的臭氧水消毒劑，浸泡消毒至規(guī)定作用時間，取出玻片載體，移入含 1ml 細胞維持液的試管中。振打后，取樣按 2.1.1.10.4 所示方法檢測殘留脊髓灰質炎病毒滴度。
(5)將未消毒的染有脊髓灰質炎病毒的玻片，加到1.0ml的無菌蒸餾水中，浸泡至規(guī)定消毒作用的很長時間。取出玻片載體，移入含 1ml 細胞維持液的試管中。振打后，取樣按 2.1.1.10.4 所示方法檢測殘留脊髓灰質炎病毒滴度，作為陽性對照。
（6）陰性對照，用不含脊髓灰質炎病毒的完全培養(yǎng)基作為陰性對照，以觀察培養(yǎng)基有無污染，細胞是否生長良好。
(7) 試驗重復 3 次。
    (8) 根據(jù)各組的平均病毒感染滴度（TCID₅₀ ），分別計算其對病毒的滅活對數(shù)值。
2.1.5.8.6  評價規(guī)定
對細菌及其芽孢和真菌，在3次試驗中，所設陽性對照組的回收菌量在5 × 10⁵cfu/片～5 × 10⁶ cfu/片，陰性對照無菌生長，試驗組中每次試驗細菌及其芽孢和真菌的殺滅對數(shù)值均≥3.00；對脊髓灰質炎病毒，在3次試驗中，所設陽性對照組，脊髓灰質炎病毒滴度達10⁵ (TCID₅₀)，陰性對照細胞無污染，試驗組中每次試驗病毒滴度下降4個對數(shù)值者，該組作用時間可作為實驗室試驗消毒合格的很短作用時間。
若陽性或陰性對照組的結果與上述要求不符，試驗作廢，重新進行。
2.1.5.8.7  注意事項
對試驗結果有懷疑時，可在試驗時同步進行臭氧濃度測定，以便作進一步的分析。
很后，北京同林臭氧發(fā)生器專家指出：臭氧水消毒器（臭氧水機）不但要做到濃度高，而且要做到穩(wěn)定、無尾氣、濃度可調可控。北京同林臭氧水消毒器被廣泛應用在果蔬、海鮮的消毒和保鮮；包裝瓶、酒瓶的消毒等，取得了非常好的效果。